发酵罐使用全攻略：从管路到发酵的详细步骤

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1.发酵罐管路详解

通过示意图展示了发酵罐的管路布局，包括蒸汽、空气和冷水的流动方向，以及数据线的走向。上图清晰地展示了10L通气搅拌发酵罐的管路布局。其中，红线指示蒸汽的流动方向，蓝线代表空气的流入，绿线则表示冷水的流动路径，而黑色虚线则概括了数据线或电线的走向。通过这个示意图，我们可以对发酵罐的管路系统有一个直观而全面的了解。

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2.发酵罐操作详解(流程)

发酵罐的操作流程包括多个关键步骤，确保发酵罐处于无菌状态。首先，必须对发酵罐的各个部件进行全面的检查，确保它们处于正常工作状态。这涵盖了安全阀、管路（特别是蒸汽、空气和冷却水管路）、线路以及是否存在漏电现象等方面的检查。

操作流程：

一旦确认所有部件都正常，接下来是进行空气过滤装置的消毒。这涉及到打开蒸汽发生器，加热蒸汽至0.2Mpa后，通过放气阀门进行确认。同时，需要关闭空气阀门、冷却水阀门以及入罐入套层的蒸汽阀门等。随后，打开粗过滤器和细过滤器的排污管阀门进行排水，排完后调整至微微打开状态。同样，打开入罐空气管路排污阀门进行排水，并确保在排污后也关至微微打开状态。接下来，微微打开入罐空气阀门，并打开发酵罐排气管。通过调整蒸汽入粗过滤器阀门和入罐空气阀门的开关大小，将两个过滤器的压力调整至0.125Mpa，温度维持在121℃，并进行30分钟的灭菌操作。

灭菌完成后，启动空气压缩机，调整压力至0.4Mpa。同时，打开控制台和空气过滤器的入空气阀门，调整空气流量以使转子流量计显示较高风量。随后，打开入罐空气阀门（即蒸汽阀门），并确保三个排污阀门已关闭。进一步调整各个阀门，使两个过滤器的压力维持在0.05Mpa。这样，无菌空气过滤系统的灭菌操作就完成了。

△ 空消操作步骤

空消过程中，调节蒸汽和空气阀门，确保罐内压力和温度符合标准，完成灭菌操作。包括打开罐底部入罐蒸汽阀门和蒸汽阀门，通入蒸汽并开启放气阀门。通过调整阀门，将罐内压力和温度分别调整至0.125Mpa和121℃，并进行30分钟的灭菌。完成后，关闭相关阀门并注意保持空气入罐阀门微微打开的状态。

△ 实消与接种

实消过程再次加热灭菌，并在温度适宜时进行接种，保持罐内正压以减少污染风险。打开套层和发酵罐的蒸汽阀门，加热至罐内温度达到60～70℃。接着，打开罐底部入罐蒸汽阀门，让蒸汽进入发酵罐，并通过放气阀门确保蒸汽发生器出口压力维持在0.4MPa。继续加热至罐内压力和温度分别达到0.125MPa和121℃，然后进行30分钟的灭菌。灭菌完成后，先关闭罐底入罐蒸汽阀门，再依次关闭蒸汽阀门和套层蒸汽阀门。最后，打开冷却水管路，将发酵罐冷却至所需的培养温度。

接下来是接种操作。在实消后，将罐体温度降至培养所需的温度，然后打开空气入罐阀门，保持罐内压力在0.05MPa以避免负压形成。接着，将空气入罐阀门关小，维持罐内为正压，通常在0.01MPa左右。关闭转速后，点燃火环酒精并打开接种口，同时戴上半湿的长筒手套（最好是灭菌的，并加无菌水）。将三角瓶内的种子倒入发酵罐中，整个操作应在火焰保护下进行。完成后关闭接种口并去掉火环。

△ 发酵与放罐

发酵终点时结束发酵，冷却后放罐，严格执行洗涤和空消程序，确保设备清洁。当达到发酵终点的各项指标时，即可结束发酵并放罐。放罐前，需关闭空气系统、冷却水系统和搅拌系统。待罐压接近零时，打开放料阀将发酵料液放入储罐中以待后续工序处理。

发酵完成后，必须立即对发酵罐进行彻底洗涤，可采用浸泡、冲洗或使用毛刷等方法，确保无死角，以防止残留的培养基污染杂菌。洗涤完毕后，应进行空消处理，以杀灭罐内可能残留的微生物，确保发酵罐的清洁度，从而为下次使用做好准备。

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3.电极校准与取样

△ 电极校准步骤

pH电极通过不同缓冲液进行校准，确保读数准确性；溶氧电极通过饱和亚硫酸钠溶液设定零点。pH电极的校准步骤如下：首先，将控制台参数调整至电极校正模式，并选择pH电极校正功能。接着，将pH电极浸入pH7.0的缓冲液中，该缓冲液由0.2mol/L的Na2HPO4和0.1mol/L的柠檬酸配制而成。当电极获得稳定读数后，立即将pH电极屏幕显示的值设定为缓冲液的实际pH值。

完成上述步骤后，用蒸馏水清洗电极的玻璃球泡部分，并用软纸轻轻擦干。然后，将电极浸入第二种缓冲液中，其pH值为9.2或4.0，同样进行稳定读数后的设定。如此反复进行校准，直至电极读数与被测试剂的实际pH值相符并保持稳定。

△ 参数设定与取样

参数根据指南设定，定时取样监测发酵情况并实施补料与消泡，保证过程稳定。参数设定及操作指南和实时监控需要紧密配合，以确保发酵过程顺利进行。

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4.实训步骤

△ 实训目的与设备

通过实训掌握发酵罐构造与管路系统，所需设备包括发酵罐、空气压缩机等。实训目的是深入了解发酵罐的详细构造和熟练掌握发酵罐的管路系统。

△ 详细步骤

从全面检查设备开始，经过消毒灭菌、电极校正与接种等步骤，培养发酵并最终完成洗涤。通过实训，学员能够系统地掌握发酵罐的操作流程和日常维护方法，为实际生产中的应用打下坚实基础。